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馬Elisa試劑盒試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因

更新時(shí)間:2022-10-28      瀏覽次數(shù):1076
  馬Elisa試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。下面我們談?wù)劜僮髦懈鱾€(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法。
  下面分析馬Elisa試劑盒試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法
  選擇馬Elisa試劑盒:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
  2加樣可能原因:)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));
  3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。解決辦法:)標(biāo)本為血清:將血液先自然存放-2小時(shí)后,再用3000rmp離心5分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒混合5-0次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心5分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。2)加樣后及時(shí)放入孵箱。3)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。4)如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。5)標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
  3孵育可能原因:)孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;2)孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:)貼封片或加蓋;2)按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
  4洗板可能原因:)采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。2)采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。3)反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。解決辦法:)保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;2)合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
  5顯色可能原因:)顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;2)加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:)顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用;2)加樣時(shí)保持顯色劑不外流;3)A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。6終止可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。7讀板如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
  所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸;盡可能實(shí)現(xiàn)馬Elisa試劑盒檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
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